目的探讨非酒精性脂肪肝（NAFLD）患者血清中22种胆汁酸亚组分、17项常规生化指标的变化，以及单独或联合检测上述指标对NAFLD的诊断作用。方法选取168例NAFLD患者（NAFLD组）及216例非NAFLD表观健康者（非NAFLD组），分别使用液相色谱-串联质谱法测定其血清胆汁酸亚组分，全自动生化分析仪检测常规生化指标。结果NAFLD组和非NAFLD组12项胆汁酸亚组分、12项常规生化指标水平比较，差异有统计学意义（P<0.05）。相比常规生化指标，胆汁酸亚组分受体重指数（BMI）的影响更小。联合3项胆汁酸亚组分［牛磺酸结合型胆汁酸包括牛磺胆酸（TCA）、牛磺脱氧胆酸钠（TDCA）、熊去氧胆酸（UDCA）］与3项常规生化指标［丙氨酸氨基转移酶（ALT）、5′-核苷酸酶（5′-NT）、小而密低密度脂蛋白胆固醇（sd-LDL-C）］诊断NAFLD的曲线下面积最大，为0.810。结论NAFLD患者血液中有12种胆汁酸亚组分发生了变化，且将胆汁酸亚组分与常规生化指标联合检测可在一定程度上提高对NAFLD的诊断效能。