结肠癌是人类消化系统常见的恶性肿瘤。5-氟尿嘧啶（5-FU）是结肠癌的一线治疗药物，可以单独或与其他化疗药物联用。但随着5-FU使用时长的增加，结肠癌细胞对其容易形成原发性及继发性耐药。近年来，针对5-FU耐药相关基因，在分子机制、动物模型、临床试验等不同层面取得了一定进展。该文从DNA损伤修复机制、三磷酸腺苷（ATP）结合盒转运体表达增加、信号通路异常、核苷代谢酶异常、叉头框蛋白M1（FOXM1）等方面对5-FU耐药研究进展和治疗新策略进行综述，以期为治疗结肠癌提供参考和依据。